一、制作标本的条件是什么？

1、载玻片

厚度应在0.8～1.2mm，光吸收多，不能使激发光在标本上聚集；载玻片必须光洁，厚度均匀，无明显自发荧光。

2、盖玻片

厚度在0.17mm左右，光洁。为了加强激发光，也可用干涉盖玻片，可以使荧光顺利通过，而反射激发光，这种反射的激发光女可激发标本。

3、标本

组织切片不能太厚，太厚的话激发光大部分消耗在标本下部，而物镜直接观察到的上部不充分激发。

4、封裱剂

常用甘油，无自发荧光，无色透明，荧光的亮度在pH8.5～9.5时较亮，不易很快褪去。常用甘油混合液作封裱剂。

5、镜油

用油镜观察标本时，必须使用镜油，建议有条件的话使用特制的无荧光镜油，也可用上述甘油代替，液体石蜡也可用，只是折光率较低，对图像质量略有影响。

二、使用时需要注意哪些方面

1、按照出厂说明书要求进行操作，不要随意改变。

2、在暗室中进行检查。接上电源，点燃超高压汞灯5到15分钟，等光源发出强光稳定后，眼睛适应暗室，再开始观察标本。

3、防止紫外线对眼睛的损害，在调整光源时应戴上防护眼镜。

4、检查时间每次以1到2小时左右最佳，超过90分钟的话，压汞灯发光强度逐渐下降，荧光减弱；荧光也明显减弱；最多不得超过3小时。

5、荧光显微镜光源寿命有限，标本应集中检查，以节省时间，保护光源。天热时，应加电扇散热降温，新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再用时，须待灯泡充分冷却后才能点燃。