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技术文章

做PCR实验选择0.2ml的容量还是0.1ml容量?

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选择 0.2ml 还是 0.1ml 容量的 PCR 仪,需要综合多方面因素考虑,以下是具体分析:


一、实验类型与需求

1、常规 PCR 实验:如果是进行普通的 PCR 扩增实验,对反应体系体积要求不严格,0.2ml 和 0.1ml 容量的 PCR 仪都能满足。不过,若经常需要同时处理多个样本,且每个样本的反应体系较大,如 30 - 50μl,那么 0.2ml 容量的 PCR 仪会更合适,能提供更充足的反应空间,减少因反应液体积接近管容量上限而可能导致的溢出风险。

2、荧光定量 PCR 实验:对于荧光定量 PCR 实验,由于通常使用较小体积的反应体系,如 20 - 25μl,甚至 5 - 10μl,0.1ml 容量的 PCR 仪更为适用。其反应液上方空间小,可减少蒸发影响,降低反应液被浓缩的可能性,有助于提高实验结果的稳定性和精确性。同时,对于顶部检测的荧光定量 PCR 仪,0.1ml 管的光程更短,荧光捕获率更高,能提升实验的灵敏度和准确性。


二、耗材匹配与成本

1、耗材通用性:0.2ml 的 PCR 管和 96 孔板适配大多数热循环仪、qPCR 仪和测序仪,通用性较强。而 0.1ml 的耗材在一些老型号或特定品牌的 PCR 仪上可能无法使用,在选择时要确保仪器与现有或计划使用的耗材兼容。

2、成本考量:一般来说,0.1ml 的 PCR 耗材成本相对较高,因为其制造工艺可能更复杂,且通常在质量和精度上有更高要求。如果实验规模较大,长期使用下来,耗材成本会是一个不可忽视的因素。此时,若 0.2ml 容量的 PCR 仪能满足实验需求,使用 0.2ml 的耗材可降低成本。


三、仪器性能与热传递效率

1、热传递效率:0.1ml 的 PCR 管被加热模块充分包裹,裸露部分极少,与热盖距离更近,热传递效率更高,能更快达到设定温度,且温度均匀性更好。这有助于减少实验误差,提高实验结果的重复性。0.2ml 管由于管体较高,反应液上方空间大,水蒸气在管内上升距离长,容易出现挂壁冷凝水现象,会影响荧光定量 PCR 实验的准确性。

2、仪器性能差异:部分PCR 仪针对 0.1ml 和 0.2ml 容量的模块在性能上可能有优化设计。例如,某些仪器的 0.1ml 模块升降温速率更快,温度控制更精准。但也有些仪器对两种容量的模块性能差异不大,在选择时要参考仪器的具体技术参数。


总体而言,如果主要进行荧光定量 PCR 实验,对灵敏度和准确性要求高,且仪器与 0.1ml 耗材兼容,同时不介意较高的耗材成本,那么 0.1ml 容量的 PCR 仪是较好的选择。如果是常规 PCR 实验居多,样本量较大,对成本较为敏感,或者使用的仪器对 0.2ml 容量模块的性能优化更好,那么 0.2ml 容量的 PCR 仪可能更适合。

TEL:18016231680

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