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技术文章

进口实时荧光定量pcr荧光通道哪里不同

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以下是对不同进口实时荧光定量 PCR 仪荧光通道方面的对比分析:


一、常见品牌及荧光通道数量

1、罗氏 LightCycler 系列:通常具备多个荧光通道,比如有的型号有 4 - 6 个通道,可满足同时检测多种不同荧光标记的荧光基团,像常见的 FAM、VIC、CY5 等,能在单次实验中实现对多个目标基因的并行检测。

2、赛默飞 QuantStudio 系列:有多种配置可选,一般涵盖 3 - 5 个荧光通道,不同通道适配不同的荧光染料,方便灵活开展多基因定量分析等实验,通道的检测灵敏度较高,可精准捕捉荧光信号变化。

3、伯乐 CFX 系列:通常配备 4 - 5 个荧光通道,其通道在波长选择等方面进行了优化,能够较好地区分不同荧光染料发射的信号,对于一些近红外等特定波段的荧光检测也有不错的表现,利于复杂样本中多靶标检测。


二、通道波长范围及适用性

1、罗氏 LightCycler 系列:其荧光通道的波长范围较广,例如对于激发波长覆盖从可见光到近红外区域的多个波段,能适配市面上大多数常用的荧光染料,无论是用于核酸定量检测,还是基于荧光探针的基因分型等实验,都可以找到合适的通道及对应的染料组合来实现准确检测。

2、赛默飞 QuantStudio 系列:各通道有着精准的波长设定,激发波长和发射波长的范围经过优化后,对于一些新型的、具有更窄发射光谱的荧光染料有很好的兼容性,这使得在开展一些高灵敏度、高特异性要求的科研项目,比如稀有突变基因检测时,可以选择更合适的荧光染料通过对应通道进行检测。

3、伯乐 CFX 系列:波长范围针对性强,特别是在一些适合生物样本自身荧光背景下能突出目标荧光信号的波段有较好配置,比如在检测一些本身带有一定杂质荧光干扰的临床样本核酸时,通过合理选择通道对应的荧光染料,能有效降低背景干扰,提高检测的准确性和可靠性。


三、通道间的串扰情况

1、罗氏 LightCycler 系列:在仪器设计和光学系统优化方面下了功夫,通道间的串扰程度较低,通过先进的滤光片等光学组件,能够很好地将不同通道对应的荧光信号进行区分,使得检测数据更加准确,避免了因串扰导致的假阳性或假阴性结果,在多通道同时检测复杂样本时优势明显。

2、赛默飞 QuantStudio 系列:采用了高精度的光学隔离技术等手段来降低通道串扰,各通道的荧光信号独立性强,哪怕是同时检测多个荧光信号强度相近的目标基因,也能清晰准确地分辨出每个通道对应的信号,保障了定量分析的精度,尤其适用于需要精确对比不同基因表达量差异的实验。

3、伯乐 CFX 系列:同样注重解决通道串扰问题,其光路设计和信号处理算法,使得通道间串扰得到有效控制,在进行荧光染料组合较为复杂、多通道长时间连续检测的情况下,依然可以维持稳定且准确的检测结果,对于高通量的荧光定量 PCR 检测需求能够较好地满足。


四、荧光通道的灵敏度差异

1、罗氏 LightCycler 系列:整体荧光通道灵敏度表现出色,对于低浓度的核酸模板,能够通过灵敏的荧光信号捕捉和放大系统,准确检测到荧光信号的变化,实现对微量核酸的定量分析,在一些病原体早期检测等对灵敏度要求高的应用场景中能发挥很好的作用。

2、赛默飞 QuantStudio 系列:以高灵敏度为特点之一,其荧光通道结合先进的光电检测元件,对于微弱的荧光信号变化感知敏锐,在检测单拷贝基因或者低丰度转录本等实验中,可以提供可靠的数据,而且不同通道的灵敏度一致性较好,确保多通道检测时结果的均衡性。

3、伯乐 CFX 系列:在灵敏度方面也有良好表现,尤其是对一些荧光衰减较快或者本身荧光强度相对不高的染料,其通道能够有效地收集和检测信号,在实时监测荧光信号动态变化的过程中,能精准捕捉到关键的信号转折点等信息,有助于准确进行定量分析和熔解曲线分析等操作。


不同进口实时荧光定量 PCR 仪的荧光通道在数量、波长范围、串扰情况以及灵敏度等方面各有特点,用户需要根据自身的实际实验需求,如检测的基因数量、样本类型、对灵敏度的要求等因素综合选择合适的仪器。

TEL:18016231680

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