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使用赛默飞VeritiPro 96 PCR仪时,需注意以下关键细节以确保实验的准确性和仪器的长期稳定性:
一、仪器放置与环境要求
1、将PCR仪放置在平稳、干燥、通风良好的位置,远离热源和强电磁干扰源,避免影响温控系统和电子元件。
2、环境温度建议保持在18~35℃,湿度控制在60%左右,并配备功率≥3000W的稳压电源。
3、仪器之间应保持50cm以上距离,以减少相互干扰。
二、操作前的准备
1、检查反应管或96孔板是否密封良好,避免样本泄漏影响实验结果。
2、确保试剂在有效期内,储存条件符合要求(如避光、低温等)。
3、加样时避免产生气泡,使用同一吸液器和枪头以减少交叉污染。
4、若样本量较少,可在样品槽两侧各加两排8联管,以保持热盖平整,提高加热均匀性。
三、程序设置与运行
1、程序设计完成后,务必仔细检查温度、时间和循环次数,避免参数错误导致实验失败。
2、梯度PCR设置时,相邻梯度温度差不得超过5℃。
3、运行过程中切勿随意打开仪器门,以免破坏温度平衡。
4、对于短片段扩增(100~300bp),可采用二温度点法(如94℃变性,65℃退火/延伸),以提高效率。
四、使用后的清洁与维护
1、实验结束后,及时用95%乙醇或中性肥皂水清洁样品槽和热盖,避免残留核酸污染。
2、运行50℃程序5~10分钟,使残留液体挥发。
3、长期不使用时,每隔半个月开机自检20分钟,防止元件老化。
通过遵循以上细节,可确保VeritiPro 96 PCR仪的高效运行,同时提高实验数据的可靠性和重复性。如需更详细的操作指南,可参考仪器说明书或相关技术文档。