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Qubit 4.0熒光計是Thermo Fisher Scientific公司推出的一款高靈敏度、高特異性的定量儀器，專用于精確測量DNA、RNA、蛋白質等生物分子的濃度。以下是其核心特點和使用方法的總結：
一、適用檢測類型
1、核酸定量
DNA：dsDNA（雙鏈）、ssDNA（單鏈）、microRNA、小片段DNA（如NGS文庫）。
RNA：總RNA、mRNA等。
靈敏度：可檢測低至0.5 pg/μL（高靈敏度試劑）至100 ng/μL（寬范圍試劑）。
二、蛋白質定量
兼容多種熒光染料（如Qubit Protein Assay Kit），適合低濃度樣本（0.05–5 mg/mL）。
三、Qubit4.0熒光計核心優勢
1、高特異性：熒光染料僅結合目標分子（如dsDNA），避免污染物（如鹽、游離核苷酸）干擾。
2、高靈敏度：比紫外分光光度法（Nanodrop）更準確，尤其適用于低濃度或復雜樣本。
3、操作簡便：觸摸屏界面，預置標準曲線，無需用戶校準。
四、操作步驟
1、試劑準備
選擇對應的檢測試劑盒（如Qubit dsDNA HS Assay Kit）。
將熒光染料與緩沖液按比例混合，配制工作液。
2、標準品檢測
使用試劑盒提供的標準品（通常2個濃度點）建立標準曲線。
3、樣本檢測
將1–20 μL樣本與工作液混合，室溫孵育2–5分鐘。
插入Qubit 4.0，選擇對應檢測程序，讀取濃度。
4、數據分析
儀器自動計算濃度，結果可直接導出或保存。
五、注意事項
1、樣本體積：推薦使用1–20 μL，濃度需在試劑檢測范圍內。
2、避免污染：手套操作，防止RNase/DNase污染（核酸檢測時）。
3、染料特異性：不同分子需匹配專用染料（如RNA檢測不可用dsDNA染料）。
4、動態范圍：超出范圍時需稀釋或換用寬范圍試劑。
