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怎么選購BioRad伯樂電穿孔系統(tǒng)電極杯?

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電極杯是電穿孔實驗中的核心耗材,其選擇直接關系到實驗的成敗。選購時,您需要依次考慮以下四個關鍵因素:


一、選購伯樂電極被核心要素

電極杯兩極之間的精確距離(以毫米計)決定了電擊時產(chǎn)生的電場強度(E, V/cm)。電場強度(E) = 電壓(V) / 間隙(cm)。因此,間隙是選擇電極杯最關鍵的參數(shù),它必須與您的實驗 protocol 和細胞類型相匹配。


二、常見間隙及適用場景

1、間隙大小:1 mm

適用細胞類型:細菌、酵母、部分懸浮哺乳動物細胞

特點及應用:常用。適用于大多數(shù)細菌轉(zhuǎn)化(如大腸桿菌),所需電壓較低。

2、間隙大小:2 mm

哺乳動物細胞(貼壁或懸浮)、植物原生質(zhì)體

非常常用。適用于多種真核細胞轉(zhuǎn)染,提供了電場強度和細胞存活率之間較好的平衡。

3、間隙大小:4 mm

非常脆弱的細胞,如植物原生質(zhì)體、某些昆蟲細胞

需要較低電場強度時使用。所需電壓較高,但電流較小,熱效應較低。

簡單總結(jié):小間隙(如1mm)用于小細胞(細菌)和高電場強度;大間隙(如2mm, 4mm)用于大而脆弱的細胞和較低電場強度。


三、材質(zhì)與工藝 - 影響實驗一致性和安全性

1、電極材質(zhì):伯樂的電極杯通常采用高純度的鋁電極。鋁能提供優(yōu)異的導電性和一致的電場分布,是標準選擇。確保電極光滑、無劃痕。

2、杯體材質(zhì):通常為無菌、生物清潔級的透明聚苯乙烯,便于觀察樣品。

3、工藝質(zhì)量:選擇無縫一體成型的杯體。有縫的廉價替代品容易在電擊時發(fā)生泄漏或電弧放電,導致實驗失敗甚至損壞電穿孔儀。


四、如何根據(jù)您的系統(tǒng)和實驗進行選擇

1、確認您的電穿孔儀型號:

伯樂常見的電穿孔系統(tǒng)如 Gene Pulser Xcell、MicroPulser、Gene Pulser II 等,都使用標準規(guī)格的電極杯(長寬高一致)。您主要需要選對間隙,而無需擔心兼容性問題。這些儀器的電極槽設計就是為這種標準杯服務的。

2、參考已有Protocol:

如果您是重復經(jīng)典實驗(如大腸桿菌DH5α的轉(zhuǎn)化),文獻或?qū)嶒炇业募榷╬rotocol中會直接指定使用 1 mm 間隙的電極杯。

如果是轉(zhuǎn)染一種新細胞,首先查閱文獻中類似細胞使用的參數(shù)(電壓、電容、電阻)和電極杯間隙。伯樂也提供了大量針對不同細胞類型的推薦protocol。

3、進行條件優(yōu)化:

如果找不到參考,您需要進行優(yōu)化實驗。通常的方法是固定脈沖時間(或電容/電阻)和DNA用量,使用同一間隙(如2mm)的電極杯,在不同電壓下進行測試,找到轉(zhuǎn)換效率高且細胞死亡率低的“甜蜜點"。


五、選購總結(jié)與清單

在購買前,請核對以下清單:

間隙(Gap):我的實驗對象需要____ mm的電極杯?(細菌選1mm,哺乳動物細胞常用2mm)

無菌性:我的實驗需要無菌包裝嗎?(是/否)

酶潔度:我的核酸樣品需要無DNase/RNase認證嗎?(是/否)

包裝數(shù)量:我需要單支包裝還是多支包裝?

品牌與質(zhì)量:我是否選擇伯樂原廠或口碑好的高質(zhì)量兼容品牌以確保結(jié)果一致性和可靠性?(強烈建議初學者和重要實驗使用原廠產(chǎn)品)

TEL:18016231680

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